海豹油对空间学习记忆的影响

海豹油对空间学习记忆的影响

摘要：小鼠侧脑室注射Aβ引起痴呆模型，多次口服海豹油后可改善小鼠对Morris水迷宫立体空间学习记忆功能。

实验材料和方法：

动物：用25—28克，正常昆明种雄性小鼠。

药物：β-Amyloid pepfide(25-35),Sigma

     海豹油：南海市北洋发展有限公司提供。

药物配制：Aβ(25-35)1mg溶于1ml灭菌双蒸水中。

         海豹油用蒸溜水配成0.1g/ml和0.2g/ml两种浓度，并用超声波制成乳剂。

     实验方法：

Aβ(25-35)在37℃配养箱中老化96小时，使其成为有毒性的凝聚态Aβ，将动物随机分为4 组；假手术组、模型组、低剂量（1g/kg体重）海豹油组、高剂量（2g/kg体重）海豹油组。假手术组小鼠侧脑室注射生理盐水3μl,其它三组小鼠侧脑室注射凝聚态Aβ(25-35)3μl。小鼠侧脑室注射凝聚态Aβ(25-35)后第二天开始灌胃給药连续18天，假手术组和模型组每天灌胃等量蒸溜水。小鼠侧脑室注射凝聚态Aβ(25-35)后，第14天开始对小鼠进行Morris水迷宫测试，连续5天，每天训练两个项限。

实验室温度保持在24--25℃,Morris水迷宫中温水加至高过安全平台1cm,水温保持在22℃.奶水中不能明显见到安全平台.将安装好的摄像装置与计算机、监视器及打印机连接,先打开计算机,再打开其它设备。

1.  在菜单中打开采集,在监视器和显视器中调节摄像头最佳位置.

2.    在菜单中打开文件,选择新建实验后设定一文件名,确定.

3.    在菜单中打开设置,设定开场，输入水迷宫直径(120cm)

4.    在菜单中打开设置,点击测量范围,键盘上调整测量范围的大小(可比液面稍大,但必需将整个液面设置在内).

5.    在菜单中打开设置,点设取装置图像,确定.

6.    将安全平台放置其中一个项限(圆行水箱平均分为四个项限)离箱壁15—20cm,在软件的实时录象中设定平台区域.

7.    在菜单中打开记录,点拍摄设置。

8.    在菜单中打开记录,可以开始试验,点击开始拍摄实验。

9.    在菜单中打开记录，将鼠标放在结束实验栏，观察监视器，动物找到安全平台马上点击结束实验，若动物在设定时间内仍未找到安全平台，则实验自动停止。

10. 在菜单中打开文件，点击此文件名后，在菜单中打开分析，点击数据处理，等待数据处理完毕即可。打开实验结果，打印。

结果：

    口服海豹油后对Aβ引起痴呆模型，用Morris水迷宫测试测定动物立体空间学习记忆，寻找安全台潜伏时间，训练第1—4天给药组与模型对照组比较各组无明显差异；第五天与模型对照组比较，低剂量（1g/kg体重）海豹油组、高剂量（2g/kg体重）海豹油组均能明显提高空间学习能力。（见下表）

海豹油对小鼠Morris水迷宫第五天寻找安全台潜伏期的影响

结论：

小鼠侧脑室注射Aβ引起痴呆模型后，连续口服海豹油1g/kg、2g/kg可明显提高小鼠对Morris水迷宫立体空间学习记忆的能力。

讨论：

    用计算机管理和摄像监控于Morris水迷宫测定动物立体空间学习记忆能力的方法是国际上先进技术，测定指标客观，实验重复性强，使用方便，可将实验结果重放，用于保健品和药物对学习记忆功能测定是一种非常好的方法，也有助于我们的实验结果在国际上的认可。